即用型免疫组化Biotin SP-AP试剂盒
一、 简介
北京鼎国Biotin SP-AP(生物素—链霉菌抗生物素蛋白-碱磷酶)免疫组化试剂盒适用于冰冻切片和石蜡切片上细胞表面抗原及细胞内抗原的准确、快速定位分析。同时,也可用于培养和固定的细胞、血细胞涂片的免疫组化和细胞化学分析。
根据一抗来源的不同,产品分为以下三种;每种试剂盒提供两种包装,分别为5ml/100片和10ml/200片;每个包装具有一个唯一的产品编号。
一抗来源 产品名称 产品编号
鼠/兔 敏感型SP(鼠和兔)试剂盒 DGSP-A11/DGSP-A12
鼠 敏感型SP(鼠)试剂盒 DGSP-A21/ DGSP-A22
兔 敏感型SP(兔)试剂盒 DGSP-A31/ DGSP-A32
二、 试剂盒组成
a) DGSP-KIT-1 正常动物非免疫血清,工作液。最小包装:每支5ml。
b) DGSP-KIT-2 生物素标记的第二抗体,工作液。最小包装:每支5ml。
c) DGSP-KIT-3 链霉菌抗生物素蛋白—AP,工作液。最小包装:每支5ml。
d) DGSP-KIT-4 BCIP/NBT显色液。最小包装:每支5ml。。
三、 自备试剂及用品
a) 一抗
b) 淋洗缓冲液(PBS缓冲液)
c) 蒸馏水
d) 复染剂
e) 封片剂
f) 免疫组化用PAP笔
g) 孵育盒
h) 定时器
i) 显微镜
四、 染色步骤
1. 石蜡切片用二甲苯脱蜡。
2. 梯度酒精水化后,在蒸馏水中漂洗5分钟。
3. 用PBS(pH=7.4)冲洗三次, 每次3-5分钟。
4. 每张切片加1滴或50μl正常动物非免疫血清(试剂1),室温下孵育10分钟。
5. PBS(pH7.4)冲洗5分钟。
6. 每张切片加1 滴或50μl的第一抗体(用户自备), 室温下孵育60分钟或4℃过夜。
7. PBS 冲洗三次,每次5分钟。
8. 每张切片加1 滴或50μl 生物素标记的第二抗体(试剂2), 室温下孵育10分钟。
9. PBS 冲洗三次,每次5分钟。
10. 每张切片加1滴或50μl链霉菌抗生物素蛋白—AP(试剂3),室温下孵育10分钟。
11. PBS 冲洗三次,每次5分钟。
12. 每张切片加1滴或50 μl BCIP/NBT显色液(试剂4), 观察5-15分钟, 阳性显色为蓝黑色。
13. BCIP/NBT 染色后,自来水冲洗,甲基绿复染液复染。
14. 复染后,蒸馏水冲洗,脱水,中性树胶封片。
五、保存和有效期:
本产品应尽量避免接触皮肤和衣物。因试剂内含有叠氮化钠,因此在处理试剂沉着物时应尽量冲洗干净。本试剂盒可在4℃ 保存1 年。
