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组成：
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1．溶液A |
(RNA 变性液) |
60ml |
－20℃ |
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2．溶液B |
(氯仿) |
6ml |
4℃ |
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3．溶液C |
(抽提液) |
60ml |
4℃ |
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4．溶液D |
(3M NaAc(PH5.2)) |
3ml |
4℃ |
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5．溶液E |
(水) |
3ml |
4℃ |
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6．溶液F |
(LiCl 6M) |
20ml |
4℃ |
实验步骤：
1 取200-500mg植物组织，液氮研磨成粉末，立即转移至离心管中。
2. 向样品管中加入2000ul裂解液，充分震荡，使沉淀完全溶解。
3． ≥12000rpm 离心5分钟，弃沉淀。
4. 加200ul氯仿充分混匀，12000rpm离心5分钟。
5. 小心吸取上层水相，加入等体积酚、氯仿、异戊醇（抽提液）
（24：24：1），12000rpm离心5分钟。
6. 重复步骤5两次。
7. 吸取上清800ul，加800ul 6M LiCl，冰浴1小时。
8. 12000rpm 4℃离心10分钟，弃上清。
9． 加400ul H2O，40ul NaAc，55℃ 10分钟。
10．12000rpm 4℃离心10分钟弃沉淀。
11．加1ml无水乙醇，-80℃15分钟或-20℃ 1小时。
12．12000rpm 4℃离心10分钟。
13 真空抽干或室温晾干20分钟。
14. 50ul H2O 55℃溶解10分钟。
15. 样品-80℃保存。
试剂盒说明：
1 本试剂盒可于-20℃稳定保存一年有效。
2 本试剂盒提取RNA为细胞总RNA,纯度能达到分子生物学各种要求
3 细胞量不宜过多,如需大量提取RNA,可按比例相应扩大RNA裂解液的量.
4 只用本试剂盒所带水.
5 组织每增加100mg，相应试剂要增加一倍。 |