概述：细胞发生凋亡时，染色质DNA在核小体之间发生断裂，最终形成200bp整数倍的DNA片段，这些DNA片段被提取后，经电泳及溴化乙锭染色后形成梯子状外观，谓之DNA Ladder.本试剂可提取107~108细胞，凋亡率在20%以上则可得到Ladder。

组成：
1．溶液A    25ml     5N异硫氰酸胍
2．溶液B    80ml     4N NaClO4  PH5.2
3．溶液C    1.2ml    Resin 用时充分混匀
4．溶液D    15ml     洗液Ⅰ用时加入15ml无水乙醇，充分混匀
5．溶液E    12ml     洗液Ⅱ用时加入18ml无水乙醇，充分混匀
6. 溶液F    3ml      TE buffer

步骤：
1．a) 称取100~300mg动物组织，液氮研磨，快速转入1.5ml离心管，加入1ml溶液A，用移液器反复吸打，使之充分裂解,室温放置5分钟。
   b) 取100~300mg动物组织，用小剪刀尽量剪碎，加入1ml溶液A，转入1.5ml离心管，
冰浴超声破碎，室温放置5分钟。
   c) 取100~300mg动物组织，用小剪刀尽量剪碎，转入匀浆器，加入1ml溶液A，电动
匀浆。室温放置5分钟。
2．≥8000rpm离心5分钟。
3．将上清移入5ml离心管中，加入2.5ml溶液B，50μl溶液C，充分混匀，室温10~20分钟。
4. ≥8000rpm离心1分钟，弃上清。
5. 加入800ul溶液B，混匀，≥8000rpm离心1分钟，弃上清。
6. 加入1ml溶液D，充分混匀，≥8000rpm离心30~60秒，弃上清。
7. 加入1ml溶液E，充分混匀，≥8000rpm,离心30~60秒，弃上清。
8．≥12000rpm，离心1分钟，吸干上清，室温晾干约5~10分钟。
9．加入50~100ul溶液F，混匀，40~50℃水浴1~5分钟。
10.≥12000rpm离心30~60秒，取上清，即为DNA。
11.取20~40μl进行0.8%Agarose电泳，观察DNA是否出现Ladder形状，是即为已发生凋亡，否则即为未发生凋亡或不足以检测出来。

注：
1.组织若多，可适当加大溶液A和溶液C的用量，其它成份不变。
2.混匀一定要温和，否则DNA大分子将被打断而部分降解。
3.本试剂盒可检测到三个月小鼠胸腺组织DNA  Ladder。