A002 动物细胞基因组DNA快速提取试剂盒(20T)
作者:周卫东 来自:鼎国公司 点击:0 时间:2006-7-11
概述:
本方法用于动物细胞基因DNA的快速提取,可提取107-108动物细胞,其质量能够满足各种分子生物学要求。
组成:
1.溶液A 0.5ml RNase A 10mg/ml。-20℃保存
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2.溶液B 10ml 5N异硫氰酸胍
3.溶液C 30ml 4N NaClO4 PH5.2 |
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4.溶液D 0.6ml Resin,用时充分混匀 |
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5. 溶液E 12ml 洗液(用前加入18ml无水酒精,充分混匀) |
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6.溶液F 3ml TE buffer |
步骤:
1. ≤107细胞悬浮于300ul溶液B中,反复混匀,室温放置5分钟。
2. 加入800ul溶液C,20ul溶液A,25ul溶液D,充分混匀,室温放置10~20分钟。
3. ≥8000rpm离心5分钟,弃上清。
4. 加入400ul溶液C,混匀,≥8000rpm离心1分钟,弃上清。
5. 加入500ul溶液E,混匀,≥8000rpm离心30~60秒,弃上清。
6. 重复步骤5。
7. ≥12000rpm,离心1分钟,吸干上清,室温晾干约5~10分钟。
8. 加入50ul-100ul溶液F,混匀。40~50℃保温1~5分钟。
9. ≥12000rpm离心30~60秒,取上清,即为DNA。
注:
1.细胞若多,可适当加大溶液A和溶液C的用量,其它成份不变。
2.混匀一定要温和,否则DNA大分子将被打断,而部分降解。
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